本研究采用經(jīng)典的遺傳毒理學(xué)試驗方法：小鼠骨髓微核率試驗、小鼠精子畸形分析試驗，鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變試驗、倉鼠肺成纖維細胞(CHL)染色體畸變試驗， 以曬青毛茶為對照，對不同貯藏年份的共5種代表性普洱茶產(chǎn)品進行了遺傳毒性安全性毒理學(xué)評價，以檢測其是否具有潛在的致突變和致癌毒性。?

六個茶樣的小白鼠骨髓微核試驗結(jié)果（如表） ?

普洱茶遺傳毒性——微核試驗結(jié)果

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微核試驗是根據(jù)分裂間期細胞內(nèi)殘留染色體斷片或整個染色體組成的一種圓形或橢圓形的小體，來判斷化學(xué)物質(zhì)引起染色體異常作用的一種簡便的哺乳動物體內(nèi)試驗。典型的微核呈圓形，直徑相當于紅細胞直徑的1/5～1/20，染色與核質(zhì)相同。微核出現(xiàn)是一種染色體異常現(xiàn)象，微核檢出率增高，可反映染色體畸變情況。由于其測定方法較簡便、快速可靠，所以已作為化學(xué)致突變試驗中常用的一種篩檢方法。 ?

表格上可以看出：經(jīng)六個茶樣灌胃處理的昆明種小白鼠，試驗結(jié)果均為陰性。表明六個茶樣都不存在致染色體斷裂的致突變性，各茶樣處理的小白鼠骨髓微核發(fā)生率均略低于空白對照，提示所試茶樣均具有一定的降低微核自然發(fā)生率的功能，即所試普洱茶樣具有一定的抗突變和抗癌的作用！有大量研究報道表明茶葉及其多酚類以及兒茶素類具有抗染色體損傷的功能，也有人研究發(fā)現(xiàn)綠茶可以降低某些重金屬導(dǎo)致的微核率的增加。?

普洱茶遺傳毒性--小白鼠精子畸形檢測試驗結(jié)果
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精子畸形是指精子形狀的畸形和畸形精子數(shù)量增多，畸形精子增多的原因可能是由于在精子形成過程中， 致突變源使精子形成有關(guān)的基因發(fā)生突變或某些特異染色體的重排。精子畸形試驗根據(jù)受試化學(xué)物如能影響實驗動物的精子成熟過程，則可觀察到精子頭部或尾部的形態(tài)變化。?

精子畸形試驗是檢驗生殖細胞染色體毒性的一種手段，A、B、C、D、E、F六個茶樣按各自得1/2 LD50、1/6 LD50、1/20 LD50各劑量處理后，其畸形精子率與陰性對照沒有顯著性差異，而陽性對照則比陰性對照有顯著性增加，因此判定六個茶樣各劑量的畸形精子檢測結(jié)果為陰性，四茶樣所試劑量對生殖細胞沒有致畸變作用。?

Ames試驗結(jié)果?

鼠傷寒沙門氏菌營養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變試驗通常簡稱Ames試驗，它是1975年由Ames本人完整地提出的用微生物檢測致突變物的方法，是目前檢測基因突變最常用方法之一。Ames法基本原理是鼠傷寒沙門氏桿菌的突變型(即組氨酸缺陷型)菌株在無組氨酸的培養(yǎng)基上不能正常生長，只有少數(shù)自發(fā)回變菌落生長。在有組氨酸的培基上可以正常生長，但在無組氨酸的培基中如有能引起該菌基因堿基置換或移碼突變的致突變劑存在，則突變型發(fā)生回復(fù)突變，回變?yōu)榻M氨酸非缺陷型野生型，即又可在無組氨酸培基上生長，使細菌生長增多。某些致突變劑需要激活后才能引起沙門氏菌突變型發(fā)生回復(fù)突變，由大鼠肝勻漿制備的哺乳動物體內(nèi)肝微粒體多功能氧化酶S9混合液進行受試化學(xué)物質(zhì)的代謝激活作用。測定致突然變異性物質(zhì)所引起的復(fù)歸突然變異頻度，即可以檢查受試物是否為致突變物質(zhì)。 ?

根據(jù)Ames試驗結(jié)果判定準則，當試驗受試物誘變的回復(fù)菌落數(shù)(X±S)增加，為自發(fā)對照的2倍或以上，并具有劑量效應(yīng)或某一測試點可重復(fù)的統(tǒng)計學(xué)意義增加時為陽性，從六茶樣四菌株各水平實驗結(jié)果看，六個茶樣四菌株均顯陰性。因此可以得出結(jié)論為普洱茶及烘青綠茶對TA98、TAl00、TA97及TAl02四菌株不存在明顯的抑菌現(xiàn)象，不會誘導(dǎo)四菌株發(fā)生回復(fù)突變，三種類型普洱茶及烘青綠茶中沒有引起四菌株基因堿基置換或移碼突變的致突變劑存在。?

CHL染色體畸變試驗結(jié)果?

用CHL染色體畸變試驗評價F、E兩個普洱茶樣的致突變性本試驗結(jié)果表明，無論是24ｈ及48ｈ收獲細胞進行染色體畸變分析，空白對照、溶媒對照、S9混合液對照染色體畸變率在正常范圍，在S9活化和非活化兩種測試條件下，普洱茶E在試驗設(shè)計濃度范圍內(nèi)染色體畸變率都在正常范圍，證明了普洱茶E、F在設(shè)計劑量條件下對CHL細胞沒有致突變性。